Monomix MC-NTA IMAC填料是一种金属亲和层析填料，适用于纯化组氨酸（His）标签的重组蛋白，这类重组蛋白广泛应用于生物技术领域。该填料以亲水性聚甲基丙烯酸酯微球为基质，粒径为60 μm，孔径为1000 Å，具有较高的物理和化学稳定性。填料表面具有高度亲水性，最大程度地避免了与生物类样品的非特异性吸附。在亲水性表面，以专有连接物链接了能螯合多价金属离子的羧酸基团。
Monomix MC-NTA IMAC填料有两种类型：游离酸型 (Monomix MC-NTA CA)和螯合镍离子型 (Monomix MC-NTA Ni)。游离酸型可用于金属离子去除，也可根据客户要求定制其他金属离子型填料。这两种类型的IMAC填料结构如下图所示。Monomix MC-NTA IMAC填料可重复使用。
Monomix MC60-NTA Ni
Monomix MC60-NTA CA
建议使用纯水或NaCl溶液装柱；常用线性流速下，Monomix MC60-NTA Ni填料背压低
该填料化学稳定高，可耐受0.1-0.5 M NaOH溶液清洗循环。该填料不耐EDTA及DTT。使用一段时间后需重新补充金属离子。
| 填料类型 |
Monomix MC60-NTA Ni
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Monomix MC60-NTA CA
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|---|---|---|
| 基质 |
亲水性聚甲基丙烯酸酯
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| 粒径 |
60 µm
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| 孔径 |
1000 Å
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| 组氨酸标记蛋白(His-protein) 载量/离子交换当量 |
≥35 mg/mL 填料
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>100 μeq./mL（羧酸含量）
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| 最大线性流速 |
≤1800 cm/h
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| 操作温度 |
≤40°C
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| pH适用范围 |
1-13
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| 操作压力 |
≤1 MPa(10 bar)
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| 流动相兼容性 |
水溶液，或水和乙腈、丙酮或甲醇的混合物。常用缓冲液：磷酸盐、三羟甲基氨基甲烷(Tris)和醋酸盐，也与6 M盐酸胍、8 M尿素相容
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| 期保存方法 |
50% (v/v) ，保存于20%乙醇中
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| 再生 | EDTA脱去Ni 离子后，用0.1-0.5 M的NaOH 溶液清洗干净，重新补充Ni 离子 | EDTA脱去金属离子，用0.1-0.5 M的NaOH 溶液清洗干 |
| 清洗 |
0.1 M NaOH清洗
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上样：样品泵进样30mg/mL，柱留时间5min，UV280nm信号值20mAU-20mAU收集。5min驻留时间。
淋洗：使用50mM PB，1M NaCl，pH8.0冲洗层析柱5CV，UV280nm信号值20mAU-20mAU收集。5min驻留时间。
再平衡：使用平衡液50mM PB，200mM NaCl，pH8.0再平衡层析柱3CV，5min驻留时间。
洗脱：使用洗脱液（ 50mM PB，200mM NaCl，500mM 咪唑，pH8.0）洗脱，8CV，5min驻留时间。UV280nm信号值20mAU-20mAU收集。
Column: Zenix SEC-300 (3μm, 300 Å, 4.6×300 mm)
Mobile phase: 150mM PB，pH 7.0
Flow rate: 1mL/min
Detector: UV 280 nm
Column temperature: 25 ℃
| 产品名称 | 粒径（µm） | 订货号 |
|---|---|---|
| Monomix MC60-NTA CA | 60 | 285560950 |
| Monomix MC60-NTA Ni | 60 | 285460950 |
