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  • Agarosix MC90 IMAC亲和层析填料

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      Agarosix MC90 IMAC填料是金属亲和层析填料,适用于纯化组氨酸(His)标签的重组蛋白,这类重组蛋白广泛应用于生物技术领域。该填料以琼脂糖为基质,粒径为90 μm, Agarosix MC90-Ni Excel为TED类型的Ni亲和层析填料,不用重复上Ni; Agarosix MC90-NTA Ni为NTA类型亲和填料,具有更高载量。琼脂糖基质的亲和层析填料具有良好的生物相容性,避免了与生物类样品的非特异性吸附。琼脂糖表面专有连接物链接了能螯合多价金属离子的羧酸基团。

    介质特性:

    • Agarosix MC90-Ni Excel 为TED螯合,耐受EDTA,不用重复上 Ni,减少工艺操作流程,提高生产效率。
    • 高载量,满足生产所需,Agarosix MC90-NTA Ni载量可达50mg/mL。
    • Agarosix MC90-Ni Excel具有良好EDTA耐受能力。
    • 耐碱性良好,使用寿命长。
    • 镍离子脱落非常低,避免引入金属离子杂质。
    技术参数
    填料类型 Agarosix MC90-NTA Ni Agarosix MC90-Ni Excel
    基质 高交联6%琼脂糖 高交联6%琼脂糖
    粒径 90 μm 90 μm
    pH 稳定性(操作)
    pH稳定性(CIP)
    3~12
    2~14
    2~12
    2~14
    螯合比例 4 : 2 5 : 1
    His-tag Protein载量 ≥ 50 mg/mL ≥ 35 mg/mL
    操作温度 2~40℃ 2~40℃
    操作压力 1100 cm/hr,柱高:200 mm, 压力 1.5 bar(0.5 M NaCl)
    流动相兼容性 水溶液,或水和乙腈、丙酮或甲醇的混合物、常用缓冲液 耐受100mM EDTA(2h)、10mM EDTA(24h)、10mM DTT
    Ni补充频率 Ni易脱落,一般3-5次需重新补Ni 不用重复上Ni
    清洗(CIP) 0.1 M NaOH 0.5 M NaOH
    再生条件 含0.1-1 M咪唑的缓冲溶液
    储存 4-35°C,50% (v/v) ,保存于20%乙醇中

    性能测试

     

    图1.Agarosix MC90-Ni Excel压力-流速测试

    常规线速度下(200-400cm/h),在几种常见流动相中填料压力表现良好,低于1 bar;建议装柱高度20-25 cm。

     

    图2.Agarosix MC90-Ni Excel亲和填料EDTA耐受实验

    Column:Agarosix MC90-Ni Excel、竞品Ni Excel

    Mobile Phase: A: 50mM PB,500mM NaCl,pH8.0; B: 25M PB,500mM 咪性,pH8.0

    测试样品:His-tag Protein

    在100 mM EDTA条件下泡碱1 h, Agarosix MC90-Ni Excel DBC下降至67.98%,竞品Ni Excel下降至42.06%;

    在EDTA耐受性方面,Agarosix MC90-Ni Excel具有更高的耐受性。

     

    图3.Agarosix MC90-Ni Excel与竞品耐碱性测试DBC变化

    耐碱测试实验条件

    泡碱浓度:1 M NaOH溶液

    Column:Agarosix MC90-Ni Excel、竞品Ni Excel

    泡碱测试模拟填料寿命实验,一般CIP条件0.5 M碱洗5-6CV,约30min。泡碱48h相当于96次纯化实验CIP,Agarosix MC90-Ni Excel与竞品保持在初始载量的80%左右,整体耐碱性能与竞品相当。

    应用图谱

    产品名称 粒径 订货号
    Agarosix MC90-Ni Excel 90 251590990
    Agarosix MC90-CA Excel 90 252390990
    Agarosix MC90-NTA Ni 90 251390990
    Agarosix MC90-NTA CA 90 252290990

    预装柱规格为4.2 、5 mL,包装规格为1L、5 L 、10 L、50 L。

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